《翠丝》的剧情深入探讨了跨性别者的内心世界。故事以余大雄为中心，一个看似平凡、拥有稳定家庭和事业的51岁男人。然而，大雄的内心却藏着一个不为人知的秘密——他内心深处渴望成为一个女人。多年来，他只能在眼镜店的阁楼小房间里，偷偷穿上女性衣物，释放内心的真实自我。

当大雄的挚友阿正去世后，其同性伴侣带回的骨灰触动了大雄。面对生命的脆弱和过往的回忆，大雄决定不再逃避，他要面对自己的真实感受。他开始尝试公开地以女装示人，甚至与另一位同样有跨性别倾向的“打铃哥”一同在酒吧狂欢，享受真正的自我。

然而，这一决定也给他的家庭带来了巨大的冲击。大雄的妻子安宜无法接受这一事实，家庭的和谐被打破。在经历了内心的挣扎和家人的痛苦后，大雄最终决定进行变性手术，彻底告别过去的生活，开始新的旅程。